Kľúčovým rozdielom medzi grampozitívnymi a gramnegatívnymi baktériami je to, že grampozitívne baktérie majú silnú vrstvu peptidoglykánu, a preto sa objavujú vo fialovej farbe, zatiaľ čo gramnegatívne baktérie majú tenkú vrstvu peptidoglykánu, a preto sa na konci techniky farbenia gramov objavujú v ružovej farbe.
Baktérie sú všadeprítomné prokaryoty, ktoré sú jednobunkové a mikroskopické. Patria do Kingdom Monera spolu s Archaea. Navyše majú veľmi jednoduchú bunkovú organizáciu. Štrukturálne im chýbajú vnútorné priehradky; jadro a na membránu viazané iné organely. Baktérie možno navyše klasifikovať na základe niekoľkých charakteristík, ako sú tvar, genetická výbava, zloženie bunkovej steny, počet bičíkov, výživa, biochemické reakcie atď. Gramové farbenie je jednou z techník, ktoré sa bežne používajú pri identifikácii a charakterizácii baktérií. Podľa gramového zafarbenia existujú dve kategórie baktérií, ako sú grampozitívne a gramnegatívne baktérie. Tieto dve skupiny baktérií sa navzájom líšia zložením bunkovej steny. Preto sa počas techniky farbenia v gramoch farbia rôznymi farbami.