Rozdiel Medzi Stohovacím Gélom A Separačným Gélom

2024 Autor: Mildred Bawerman | [email protected]. Naposledy zmenené: 2023-12-16 08:42

Kľúčový rozdiel - stohovací gél vs oddeľovací gél

Pojmy stohovací gél a separačný gél sa používajú na vysvetlenie techniky SDS-PAGE. SDS-PAGE alebo elektroforéza na géle dodecylsulfát-polyakrylamid sodný je laboratórna technika, ktorá sa používa na separáciu molekúl proteínov na základe ich molekulových hmotností. Teória, ktorá stojí za touto technikou, spočíva v tom, že proteíny s rôznymi molekulovými hmotnosťami vykazujú rôzne rýchlosti migrácie; molekuly s nízkou molekulovou hmotnosťou migrujú rýchlejšie, zatiaľ čo molekuly s vysokou molekulovou hmotnosťou migrujú pomaly. Migračným médiom je gél. Existujú dva typy gélov, ktoré sa nazývajú stohovací a separačný. Kľúčový rozdiel medzi stohovacím gélom a separačným gélom je ten, že pH stohovacieho gélu je 6,8, zatiaľ čo pH separačného gélu je 8,8.

OBSAH

1. Prehľad a hlavný rozdiel

2. Čo je stohovací gél

3. Čo je separačný gél

4. Vzťah medzi stohovacím gélom a separačným gélom

5. Porovnanie vedľa seba - stohovací gél vs separačný gél v tabuľkovej forme

6. Zhrnutie

Čo je stohovací gél?

Stohovací gél je nízko koncentrovaný polyakrylamidový gél, ktorý sa umiestni na vrch koncentrovanejšieho štiepiaceho gélu (separačný gél) technikou SDS-PAGE. Stohovací gél sa používa na zlepšenie rozlíšenia elektroforézy. Rozlíšenie sa zvyšuje z dôvodu rozdielu medzi koncentráciami stohovacieho gélu a rozlišovacieho gélu, ktoré majú vplyv na proteíny vo vzorke. Pretože koncentrácia polyakrylamidu v stohovacom géle je nízka, veľkosť pórov je vyššia. To tiež pomáha pri zvyšovaní separácie.

Stohovací gél je sypký polyakrylamidový gél s veľkými pórmi asi 7% polyakrylamidu. Tieto póry nepôsobia ako významná bariéra pre veľké molekuly bielkovín. Preto tento gél mierne ovplyvňuje mobilitu týchto proteínov. Toto umožňuje separáciu podľa mobility a veľkosti proteínu ich koncentráciou medzi dvoma gélmi.

Obrázok 01: SDS-PAGE akrylamidový gél

PH stohovacieho gélu je 6,8. Jeho pH je kyslé ako pH štiepenia gélu o 2 jednotky pH. Toto pH znamená nižšiu iónovú silu, a teda vyšší elektrický odpor. To vyvoláva mobilitu proteínov ako iné nabité častice prítomné v géle.

Čo je separačný gél?

Separačný gél alebo štiepiaci gél technológie SDS-PAGE je vysoko koncentrovaný polyakrylamidový gél, ktorý sa umiestňuje na vrchnú časť nízko koncentrovaného stohovacieho gélu. Separačný gél obsahuje vysoké množstvo polyakrylamidu (10%). Hodnota pH tohto gélu sa udržuje na hodnote 8,8, čo je vyššia hodnota pH ako v prípade stohovacieho gélu.

Obrázok 02: Prístroj na gélovú elektroforézu

Keď sa molekuly proteínu dostanú do separačného gélu, migrácia týchto molekúl sa spomalí, pretože separačným gélom je vysoko koncentrovaný gél s malou veľkosťou pórov, ktorý môže pôsobiť ako značná bariéra pre pohyb molekúl proteínu. Toto spomalenie umožňuje ostatným proteínom pomaly migrovať, aby stihli vzniknúť, čo vedie k úzkemu koncentrovanému pásu medzi dvoma gélmi.

Aký je vzťah medzi stohovacím gélom a separačným gélom?

V rovnakom prístroji sa používajú typy stohovacieho gélu aj separačného gélu

Aký je rozdiel medzi stohovacím gélom a separačným gélom?

Rozdielny článok v strede pred tabuľkou

Skladací gél vs separačný gél
Stohovací gél je nízko koncentrovaný polyakrylamidový gél, ktorý sa umiestni na vrch koncentrovanejšieho štiepiaceho gélu (separačný gél) technikou SDS-PAGE.	Separačným gélom alebo štiepiacim gélom technikou SDS-PAGE je vysoko koncentrovaný polyakrylamidový gél, ktorý je umiestnený na vrchu nízko koncentrovaného stohovacieho gélu.
Umiestnenie
Na štiepiaci (separačný) gél sa umiestni stohovací gél.	Separačný gél sa umiestni na dno nádoby použitej na gélovú elektroforézu.
Koncentrácia
Koncentrácia stohovacieho gélu je vysoká.	Koncentrácia separačného gélu je nízka.
Obsah polyakrylamidu
Stohovací gél obsahuje asi 7% polyakrylamidu.	Separačný gél obsahuje asi 10% polyakrylamidu.
pH
PH stohovacieho gélu je 6,8.	PH separačného gélu je 8,8.
Veľkosť pórov
V stohovacom géli sú prítomné veľké veľkosti pórov.	V separačnom géle sú prítomné malé veľkosti pórov.
Rozhodnutie
Stohovací gél poskytuje lepšie rozlíšenie.	Separačný gél poskytuje zlé rozlíšenie.

Zhrnutie - stohovací gél vs oddeľovací gél

Stohovací gél a separačný gél sú dva typy polyakrylamidových gélov, ktoré sa používajú na lepšie oddelenie molekúl proteínov v danej vzorke. Rozdiel medzi stohovacím gélom a separačným gélom je ten, že pH stohovacieho gélu je 6,8, zatiaľ čo pH separačného gélu je 8,8.