Kľúčový rozdiel - transformanti vs rekombinanti
Rekombinácia a transformácia sú dva kľúčové kroky v genetickom inžinierstve, pri ktorých sa charakteristiky organizmu zámerne modifikujú manipuláciou s jeho genetickým materiálom. Rekombinácia je proces, pri ktorom je cudzia DNA zabudovaná do vektorového genómu a vzniká molekula rekombinantnej DNA. Transformácia je ďalším krokom, v ktorom je rekombinantná molekula vložená do hostiteľského organizmu. Hostiteľská bunka alebo organizmus podporuje expresiu rekombinantnej molekuly. Kľúčovým rozdielom medzi transformantmi a rekombinantmi je, že transformanty sú bunky alebo organizmy, ktoré berú rekombinantnú molekulu dovnútra a uľahčujú expresiu, zatiaľ čo rekombinanty sú vektory, ktoré umožňujú inzerciu cudzej DNA do jej genómu a transport do hostiteľských transformantov na expresiu.
OBSAH
1. Prehľad a hlavný rozdiel
2. Čo sú transformanty
3. Čo sú rekombinanty
4. Porovnanie vedľa seba - transformanty vs. rekombinanty
5. Zhrnutie
Čo sú transformanty?
Transformanty sú bunky alebo organizmy, v ktorých je rekombinantná DNA absorbovaná na expresiu. Baktérie sa bežne používajú ako hostiteľské organizmy v genetickom inžinierstve, pretože sa ľahko pestujú, množia a manipuluje sa s nimi v laboratórnych podmienkach a transformačný proces je v porovnaní s inými organizmami ľahký. Najobľúbenejšou hostiteľskou baktériou používanou v genetickom inžinierstve je baktéria E. coli.
Počas transformačného procesu sú hostiteľské bunky indukované, aby absorbovali rekombinanty. Niektoré hostiteľské bunky však neprijímajú rekombinantné molekuly. Sú známe ako netransformanty a bunky, ktoré vo vnútri obsahujú molekuly rekombinantnej DNA, sú známe ako transformanty. Selekcia transformantov z netransformantov sa uskutočňuje pomocou selekčných markerov v molekulárnej biológii. Selektovateľné markery sa vložia do vektorového genómu spolu s DNA inzertom. Bežne používanými selekčnými markermi sú gény rezistentné na antibiotiká. Markerové gény uľahčujú diferenciáciu transformantov a pokračujú v procese. Po transformačnom procese sa baktéria pestuje v médiu obsahujúcom antibiotikum. Iba transformanty sú schopné na tomto médiu rásť, pretože majú vo vnútri rekombinanty.
Akonáhle je rekombinantná molekula DNA transformovaná vo vnútri hostiteľského organizmu, môže byť cudzia DNA buď integrovaná do genómu hostiteľskej bunky, alebo zostať neintegrovaná v cytoplazme. Expresia a replikácia cudzej DNA sa však vyskytujú v hostiteľskom organizme a vedú k požadovanému výsledku procesu.
Čo sú to rekombinanty?
Rekombinant je organizmus alebo bunka, ktorá obsahuje rekombinovaný genóm obsahujúci cudziu DNA. Rekombinanty sú výsledkom procesu genetického inžinierstva. Sú umelo vyrobené in vitro vložením požadovaných génov a modifikáciou genómu. V genetickom inžinierstve často pôsobia bakteriálne plazmidy a bakteriofágy ako rekombinanty. Má chiméru rôznych DNA. Rekombinantná molekula DNA prenáša cudzorodú DNA do hostiteľského organizmu a umožňuje jej expresiu a tvorbu požadovaného produktu.
Rekombinantné molekuly sa konštruujú pomocou reštrikčných endonukleáz a DNA ligáz. Požadovaný fragment DNA sa oddelí od pôvodného organizmu a vloží sa do vektora, aby sa vytvoril rekombinant na transformáciu. Rezanie požadovaného génu a otvorenie vektorového organizmu by sa malo uskutočniť pomocou rovnakého reštrikčného enzýmu, aby sa vytvorili kompatibilné lepivé konce, aby sa spojili. Akonáhle je cudzia DNA zabudovaná do vektorového genómu, je známa ako rekombinantná alebo molekula rekombinantnej DNA.
Obrázok 02: Rekombinantná DNA
Aký je rozdiel medzi transformantmi a rekombinantmi?
Rozdielny článok v strede pred tabuľkou
Transformanti vs rekombinanti |
|
| Transformanty sú bunky, ktoré majú vo vnútri molekulu rekombinantnej DNA. | Rekombinanty sú nosné molekuly, ktoré majú cudziu DNA vloženú do vlastného genómu. |
| Expresia cudzej DNA | |
| Sú to hostiteľské bunky, ktoré sú schopné exprimovať rekombinantnú DNA. | Mali by byť schopné sebareplikácie v hostiteľskom organizme. |
| Výber | |
| Ako hostiteľské bunky sa vyberú bunky, ktoré je možné ľahko pestovať a množiť. | Musia byť ľahko extrahovateľné a mali by obsahovať voliteľné značky. |
Zhrnutie - Transformanti vs rekombinanti
Transformanty sú bunky alebo organizmy, v ktorých sú molekuly rekombinantnej DNA. Rekombinanty sú organizmy alebo bunky, ktoré prešli genetickou rekombináciou a majú vo svojich genómoch cudziu DNA. Bakteriálne bunky sa často používajú ako hostiteľské bunky na transformáciu a plazmidy a bakteriofágy sa často používajú ako vektory v technológii rekombinantnej DNA. To je rozdiel medzi transformantmi a rekombinantmi.
