Kľúčový rozdiel - RPMI vs DMEM
Väčšina výskumných štúdií zahŕňa kultiváciu živočíšnych buniek, a preto tieto štúdie vyžadujú údržbu živočíšnych bunkových línií za zvláštnych podmienok rastu. Kultivácia živočíšnych buniek sa široko vykonáva vo farmakologických štúdiách zameraných na identifikáciu metabolizmu liekov, v diagnostike chorôb a vo výskume rakoviny. Bunkové kultivačné médium je dôležitým aspektom živočíšnej bunkovej kultúry. Dulbeccovo modifikované Eagle médium (DMEM) a médium Roswell Park Memorial Institute (RPMI) sú dve kultivačné médiá používané pri kultivácii živočíšnych buniek. RPMI je médium široko používané na kultiváciu buniek cicavcov v suspenznej kultúre. DMEM je modifikovaný typ bazálneho média so zvýšenými koncentráciami aminokyselín a vitamínov až štvornásobne. DMEM sa používa na kultiváciu buniek v adherujúcich kultúrach. Kľúčovým rozdielom medzi týmito dvoma médiami je typ kultúry médií. RPMI sa používa na suspenzných kultúrach, zatiaľ čo DMEM sa používa na kultiváciu adherentných buniek.
OBSAH
1. Prehľad a kľúčový rozdiel
2. Čo je RPMI
3. Čo je DMEM
4. Podobnosti medzi RPMI a DMEM
5. Porovnanie vedľa seba - RPMI vs DMEM v tabuľkovej forme
6. Zhrnutie
Čo je to RPMI?
RPMI alebo Roswell Park Memorial Institute Medium sa tiež označuje ako RPMI 1640. Názov média odvodil inštitút, v ktorom boli médiá objavené. Toto médium sa bežne používa v živočíšnej bunkovej kultúre, najmä na rast buniek cicavcov. Boli pôvodne vyvinuté na pestovanie ľudských lymfocytov.
Nasledujúce zložky sú obsiahnuté v RPMI.
- Glukóza
- indikátor pH (fenolová červená)
- Soli (chlorid sodný, hydrogenuhličitan sodný, fosforečnan sodný, chlorid draselný, síran horečnatý a dusičnan vápenatý)
- Aminokyseliny
- Vitamíny (i-inozitol, cholínchlorid, kyselina para-aminobenzoová, kyselina listová, nikotínamid, pyridoxín-hydrochlorid, tiamín-hydrochlorid, pantotenát vápenatý, biotín a riboflavín, kyanokobalamín)
Špeciálnou vlastnosťou RPMI je zvýšená koncentrácia fosfátu v médiu. RPMI sa používa v atmosfére 5% oxidu uhličitého. To zabezpečí maximálne a optimálne podmienky pre rast buniek. PH média sa udržuje na 8,0 pomocou hydrogenuhličitanového pufrovacieho systému.
Obrázok 01: Bunková kultúra na Petriho miske
Aplikácie RPMI v kultivácii buniek
- Kultivácia ľudských T a B lymfocytov, buniek kostnej drene a hybridómu.
- Používa sa na štúdium ľudských neoplastických buniek.
Čo je DMEM?
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) je modifikované médium, ktoré je komerčne pripravené. Pôvodná textúra stredného prášku je žltá. V DMEM sa koncentrácia vitamínov zvyšuje až štvornásobne, čím sa zvyšuje obsah živín v médiu.
DMEM sa tiež modifikuje pridaním ďalších solí, ako je dusičnan železitý, pyruvát sodný a niektorých neesenciálnych aminokyselín, ako je serín a glycín. Mení sa aj zloženie glukózy v médiu. Pôvodná formulácia obsahuje 1 000 mg / l glukózy, zatiaľ čo v DMEM sa koncentrácia zvyšuje až na 4 500 mg / l. DMEM tiež vyžaduje doplnenie média v sére, pretože to nie je úplné médium. Najčastejšie sa DMEM dopĺňa fetálnym bovinným sérom (FBS). FBS poskytuje požadované proteíny a rastové faktory pre proces kultivácie.
PH média sa mení po pridaní hydrogenuhličitanu sodného. pH média pred pridaním hydrogenuhličitanu sodného je okolo 6,80 - 7,40, zatiaľ čo pH po pridaní hydrogenuhličitanu sodného je v rozmedzí 7,60 - 8,20. Skladovacia teplota média je 2 - 8 0 C.
Obrázok 02: DMEM
Aplikácie DMEM
- Štúdium schopnosti polyomavírusu tvoriť plaky v embryonálnych bunkách myší.
- V štúdiách kontaktnej inhibície.
- Pri výskume a analýze kultúr kuracích buniek.
Aké sú podobnosti medzi RPMI a DMEM?
- RPMI aj DMEM sa používajú v kultúre živočíšnych buniek.
- Médiá RPMI aj DMEM sú kvapalné formulácie.
- Médiá RPMI aj DMEM obsahujú esenciálne aminokyseliny, vitamíny a anorganické soli potrebné na rast.
- Médiá RPMI aj DMEM sú neúplné. Preto by sa malo pridať sérum.
- Médiá RPMI aj DMEM používajú ako zdroj uhlíka glukózu.
- Médiá RPMI aj DMEM majú vyššie pH.
Aký je rozdiel medzi RPMI a DMEM?
Rozdielny článok v strede pred tabuľkou
RPMI vs DMEM |
|
| RPMI je médium široko používané na kultiváciu buniek cicavcov v suspenznej kultúre. | DMEM je modifikovaný typ bazálneho média so zvýšenými koncentráciami aminokyselín a vitamínov. |
| Prítomnosť extra fosfátov | |
| Prítomné v RPMI. | Absentuje v DMEM. |
| Použite | |
|
Používa sa na kultiváciu buniek v adherujúcich kultúrach. Je zvyknutý,
|
| Druhy kultúry | |
| RPMI sa používa pre suspenzné kultúry. | DMEM sa používa pre kultúry s adherovanými bunkami. |
Zhrnutie - RPMI vs DMEM
Tak RPMI, ako aj DMEM sa široko používajú v kultivácii živočíšnych buniek, najmä na kultiváciu živočíšnych bunkových línií vrátane lymfocytov in vitro. DMEM je modifikované základné médium, kde je zvýšená koncentrácia živín. RPMI vyvinuté Roswell Park Memorial Institute a je tiež médiom používaným pri kultivácii živočíšnych buniek, najmä pre lymfocyty cicavcov. Obe médiá sú komerčne dostupné. To je rozdiel medzi RPMI a DMEM.
