Kľúčový rozdiel - prietoková cytometria vs. FACS
V kontexte bunkovej teórie sú bunky základnou štrukturálnou a funkčnou jednotkou všetkých živých organizmov. Triedenie buniek je metodika, ktorá sa používa na oddelenie rôznych buniek podľa fyziologických a morfologických znakov. Môžu mať intracelulárne alebo extracelulárne vlastnosti. Interakcia DNA, RNA a proteínov sa považuje za intracelulárne interaktívne vlastnosti, zatiaľ čo tvar, veľkosť a rôzne povrchové proteíny sa považujú za extracelulárne vlastnosti. V modernej vede viedli metodiky triedenia buniek k tomu, aby pomáhali pri rôznych výskumoch v biologických štúdiách a tiež pri zavádzaní nových princípov prostredníctvom výskumu medicíny. Triedenie buniek sa uskutočňuje na rôznych metodikách, ktoré zahŕňajú primitívne s menším počtom zariadení a pokročilé technologické metodiky s využitím sofistikovaných mechanizmov. Hlavnými použitými metodikami sú prietoková cytometria, fluorescenčné aktivované triedenie buniek (FACS), magnetická selekcia buniek a triedenie jednotlivých buniek. Prietoková cytometria a FACS sú vyvinuté na diferenciáciu buniek podľa ich optických vlastností. FACS je špecializovaný typ prietokovej cytometrie. Prietoková cytometria je metodika, ktorá sa používa pri analýze heterogénnej populácie buniek podľa rôznych molekúl bunkového povrchu, veľkosti a objemu, ktorá umožňuje skúmanie jednotlivých buniek. FACS je proces, pri ktorom sa zmes vzoriek buniek triedi podľa charakteristiky rozptylu svetla a fluorescencie do dvoch alebo viacerých nádob. Toto je kľúčový rozdiel medzi prietokovou cytometriou a FACS.
OBSAH
1. Prehľad a hlavný rozdiel
2. Čo je to prietoková cytometria
3. Čo je to FACS
4. Podobnosti medzi prietokovou cytometriou a FACS
5. Porovnanie vedľa seba - prietoková cytometria vs. FACS v tabuľkovej forme
6. Zhrnutie
Čo je to prietoková cytometria?
Prietoková cytometria je metóda, ktorá sa používa na skúmanie a stanovenie expresie intracelulárnych molekúl a bunkového povrchu a na definovanie a charakterizáciu odlišných typov buniek. Používa sa tiež na stanovenie objemu a veľkosti buniek a na hodnotenie čistoty subpopulácií, ktoré sú izolované. To umožňuje viacparametrické hodnotenie jednotlivých buniek v rovnakom čase. Prietoková cytometria sa používa na meranie intenzity fluorescencie, ktorá sa vytvára vďaka fluorescenčne označeným protilátkam, ktoré pomáhajú identifikovať proteíny alebo ligandy, ktoré sa viažu na pridružené bunky.
Obrázok 01: Prietoková cytometria
Prietoková cytometria vo všeobecnosti zahŕňa hlavne tri podsystémy. Sú to tekutina, elektronika a optika. Pri prietokovej cytometrii je k dispozícii päť hlavných zložiek, ktoré sa používajú pri triedení buniek. Sú to prietoková cela (prúd kvapaliny, ktorý sa používa na ich transport a zarovnanie článkov pre proces optického snímania), systém merania (môžu to byť rôzne systémy vrátane ortuťových a xenónových žiaroviek, vysokovýkonných vodou chladených alebo vzduchom chladené lasery alebo diódové lasery s nízkym výkonom), ADC; Systém analógovo-digitálnych prevodníkov, zosilňovací systém a počítač na analýzu. Získavanie je proces, ktorým sa zhromažďujú údaje zo vzoriek pomocou prietokového cytometra. Tento proces je sprostredkovaný počítačom, ktorý je spojený s prietokovým cytometrom. Softvér prítomný v počítači analyzuje informácie dodávané do počítača z prietokového cytometra. Softvér má tiež schopnosť upravovať parametre experimentu riadiaceho prietokový cytometer.
Čo je to FACS?
V kontexte prietokovej cytometrie je fluorescenčne aktivované triedenie buniek (FACS) metóda, ktorá sa používa na diferenciáciu a triedenie vzorky zmesi biologických buniek. Bunky sú oddelené od dvoch alebo viacerých nádob. Metóda triedenia je založená na fyzikálnych vlastnostiach bunky, ktoré zahŕňajú rozptyl svetla a fluorescenčné charakteristiky bunky. Toto je dôležitá vedecká technika, ktorú je možné použiť na získanie spoľahlivých kvantitatívnych a kvalitatívnych výsledkov fluorescenčných signálov, ktoré sú emitované z každej bunky. Počas FACS spočiatku vopred získaná zmes buniek; suspenzia je nasmerovaná do stredu úzkeho prúdu kvapaliny, ktorý rýchlo prúdi. Prietok kvapaliny je navrhnutý tak, aby sa bunky v suspenzii oddelili na základe priemeru každej bunky. Na prúd suspenzie sa aplikuje mechanizmus vibrácií, ktorý vedie k tvorbe jednotlivých kvapiek.
Obrázok 02: FACS
Systém je kalibrovaný tak, aby vytvoril jednu kvapku s jednou bunkou. Tesne pred tvorbou kvapiek sa prietoková suspenzia pohybuje pozdĺž prístroja na meranie fluorescencie, ktorý detekuje fluorescenčné charakteristiky každej bunky. V mieste tvorby kvapôčok sa umiestni elektrický nabíjací krúžok, ktorým sa náboj indukuje pred meraním intenzity fluorescencie. Akonáhle sú kvapky vytvorené z prúdu suspenzie, vnútri kvapôčok sa zachytí náboj, ktorý potom vstupuje do systému elektrostatického vychyľovania. Podľa náboja systém odvádza kvapôčky do rôznych nádob. Spôsob aplikácie poplatku sa líši podľa rôznych systémov používaných v systéme FACS. Zariadenie používané vo FACS je známe ako triedič buniek aktivovaný fluorescenciou.
Aká je podobnosť medzi prietokovou cytometriou a FACS?
Prietoková cytometria a FACS sú vyvinuté na diferenciáciu buniek podľa ich optických vlastností
Aký je rozdiel medzi prietokovou cytometriou a FACS?
Rozdielny článok v strede pred tabuľkou
Prietoková cytometria vs FACS |
|
| Prietoková cytometria je metodika, ktorá sa používa pri analýze heterogénnej populácie buniek podľa rôznych molekúl bunkového povrchu, veľkosti a objemu, ktorá umožňuje skúmanie jednotlivých buniek. | FACS je proces, pri ktorom sa zmes vzoriek buniek triedi podľa charakteristiky rozptylu svetla a fluorescencie do dvoch alebo viacerých nádob. |
Zhrnutie - prietoková cytometria vs FACS
Bunka je základnou štrukturálnou a funkčnou jednotkou všetkých živých organizmov. Triedenie buniek je proces, ktorým sa bunky izolujú a diferencujú do rôznych kategórií na základe ich intracelulárnych a extracelulárnych vlastností. Prietoková cytometria a FACS sú dve dôležité metodiky pri triedení buniek. Oba procesy sú vyvinuté na rozlíšenie buniek podľa ich optických vlastností. Prietoková cytometria je metodika, ktorá sa používa pri analýze heterogénnej populácie buniek podľa rôznych molekúl bunkového povrchu, veľkosti a objemu, ktorá umožňuje skúmanie jednotlivých buniek. FACS je proces, pri ktorom sa zmes vzoriek buniek triedi podľa charakteristiky rozptylu svetla a fluorescencie do dvoch alebo viacerých nádob. To je rozdiel medzi prietokovou cytometriou a FACS.
Stiahnite si verziu Flow Cytometry vs FACS vo formáte PDF
Môžete si stiahnuť verziu tohto článku vo formáte PDF a použiť ho na offline účely podľa citačnej poznámky. Tu si stiahnite verziu PDF. Rozdiel medzi prietokovou cytometriou a FACS
