Acid Fast vs Non Acid Fast Bacteria
Rozdiel medzi acidorezistentnými a nekyselobežnými baktériami je v podstate v ich bunkovej stene. Baktérie sa všeobecne identifikujú a pozorujú pri rôznych postupoch farbenia. Kyselinové rýchle farbenie je jednou z takýchto metód na odlíšenie určitého typu baktérií od ostatných. Túto metódu prvýkrát objavili Franz Ziehl a Friedrich Neelsen. V tom čase nebolo možné farbiť Mycobacterium, ktoré spôsobujú tuberkulózu, a bolo možné ich pozorovať pomocou iných farbiacich postupov, ako je napríklad gramové farbenie. Neelsen a Ziehl zafarbili tieto baktérie pridaním fenolu (kyselina karbolová) a zásaditého fuchsínu (e) spolu s kyslým alkoholom, takže farbivo je známe ako roztok Carbol Fuchsin (e) alebo Ziehl - Neelsenovo farbivo.
Postup rýchleho farbenia kyselinou
Aby sme úplne pochopili acidorezistentné a nekyslobežné baktérie, najskôr prejdeme procesom farbenia. Kyselinová stálosť je vlastnosť baktérie, ktorá je odolná voči odfarbeniu kyselinami alebo kyslými alkoholmi počas farbenia. Toto pôvodne popisuje Paul Ehrlich. Počas procesu farbenia sa uskutočňujú nasledujúce tri kroky.
1. Aplikácia primárneho farbiva - Carbolfuchsin je primárna matrica, ktorá je zaplavená náterom baktérií, ktoré sú tepelne zafixované na čistom sklíčku. Aplikuje sa teplo na zabezpečenie prieniku farbiva až do cytoplazmy.
2. Odfarbenie - ošetrenie kyselinou a alkoholom na odstránenie primárneho farbiva.
3. Kontrastné farbenie - Na prezeranie bezfarebných baktérií sa nanáša metylénová modrá.
Čo sú rýchle kyslé baktérie?
Baktérie, ktoré majú stálosť v kyslom prostredí, sú známe ako kyslo odolné baktérie. Inými slovami, baktérie, ktoré sú po kroku odfarbenia počas procesu rýchleho farbenia kyselinou stále sfarbené červenou farbou, sú známe ako acidorezistentné baktérie. Čo spôsobuje, že tieto baktérie majú stálosť v kyselinách? Ak vezmeme do úvahy prierez bunkovou stenou kyslo rýchlej baktérie, dá sa to ľahko pochopiť.
Kyselinové rýchle škvrny (alebo karbolfuchsín) sa viažu iba na baktérie, ktoré majú voskovitú bunkovú stenu. Táto bunková stena obsahuje hydrofóbny voskovitý lipid známy ako kyselina mykolová, ktorý zaberá 60% bunkovej steny. Vďaka hydrofóbnym vlastnostiam je zabránené vstupu vo vode rozpustných materiálov do cytoplazmy. Preto nie je možné túto baktériu zafarbiť vo vode rozpustnými farbivami, ako je metylénová modrá. Karbolfuchsín je zložený z fenolu a fuchsínu, aby mohol prenikať až do cytoplazmy.
Počas kroku odfarbovania kyslým alkoholom sa kyslému alkoholu bráni vniknúť do cytoplazmy v dôsledku prítomnosti hydrofóbnej kyseliny mykolovej, takže nie je schopný odstrániť karbolfuchzín z bakteriálnej bunky. Primárne farbivo teda zostane v cytoplazme aj po kroku odfarbenia.
Medzi rýchle kyslé baktérie patrí niekoľko rodov, ako napríklad Mycobacterium a Nocardia, ktoré sú pre človeka patogénne a spôsobujú tuberkulózu a nokardiózu.
Acid Fast Bacteria je červená
Čo sú nekyslé rýchle baktérie?
Ak baktérii chýba stálosť v kyselinách, hovorí sa im nekyslé rýchle baktérie. Po vykonaní postupu rýchleho farbenia kyselinou sa tieto baktérie zafarbia modrou farbou. Je to preto, že nekyslé rýchle baktérie majú tenkú bunkovú stenu a v bunkovej stene im chýba kyselina mykolová. To umožňuje prienik karbolfuchzínu do cytoplazmy. Odstráni sa však pôsobením kyslého alkoholu, čím sa rýchle kyselinové rýchlo bakteriálne bunky stanú bezfarebnými. Na zreteľné pozorovanie a odlíšenie sa od acidorezistentných baktérií bude tu užitočná metylénová modrá.
Nekyslé rýchle baktérie môžu byť zafarbené pomocou gramového alebo iného jednoduchého postupu farbenia. Príklady rýchlo kyslých baktérií sú Escherichia coli, Pseudomonas sp.
Nekyslé rýchle baktérie sú modrej farby
Aký je rozdiel medzi kyslými rýchlymi a nekyselinovými rýchlymi baktériami?
• Kyslosť:
• Kyseliny rýchle baktérie vykazujú odolnosť voči kyselinám.
• Nekyslé rýchle baktérie nemajú kyslú stálosť.
• Bunková stena:
• Kyseliny rýchle baktérie obsahujú silnú bunkovú stenu s vrstvou kyseliny mykolovej.
• Nekyslé rýchle baktérie nemajú túto vrstvu.
• Gram Stain:
• Kyseliny rýchle baktérie sa ťažšie farbia pomocou gramového farbenia.
• Nekyslé rýchle baktérie je možné zafarbiť gramovým zafarbením.
• Patogénne alebo nepatogénne:
• Väčšina acidorezistentných baktérií je patogénna.
• Nekyslé rýchle baktérie môžu byť patogénne alebo nepatogénne.
• Bacily alebo koky:
• Kyseliny rýchle baktérie sú väčšinou bacily.
• Nekyslé rýchle baktérie môžu byť bacily alebo koky.
Obrázky so zdvorilosťou:
- Mycobacterium tuberculosis (zafarbené na červeno) v tkanive (modrá) cez Wikicommons (Public Domain)
- Histopatológia karcinómu prstencových buniek signálneho kruhu, PAS farbenie pomocou KGH (CC BY-SA 3)
