Kľúčový rozdiel - CFU vs MPN
Jednotka tvoriaca kolónie (CFU) a najpravdepodobnejší počet (MPN) sú dve metódy používané na výpočet mikroorganizmov vo vzorkách. Oba parametre sa používajú na detekciu kvality vody a fekálnych indikátorových baktérií vo vzorkách vody. Jednotka tvoriaca kolónie je miera použitá na výpočet počtu životaschopných bakteriálnych buniek alebo buniek húb v špecifickom objeme alebo hmotnosti danej vzorky. Štandardná jednotka pre tento parameter je CFU / ml alebo CFU / g. Najpravdepodobnejším počtom je iná jednotka používaná na meranie počtu životaschopných bakteriálnych buniek v tekutej vzorke. Kľúčový rozdiel medzi CFU a MPN je ten, že CFU sa počíta z bakteriálnych a plesňových kolónií rastúcich na pevnej agarovej platni, zatiaľ čo MPN sa počíta z životaschopných baktérií rastúcich v kvapalnom médiu.
OBSAH
1. Prehľad a kľúčový rozdiel
2. Čo je to CFU
3. Čo je to MPN
4. Porovnanie vedľa seba - CFU vs. MPN v tabuľkovej forme
5. Zhrnutie
Čo je to CFU?
Jednotka tvoriaca kolónie (CFU) je parameter, ktorý meria počet životaschopných bakteriálnych alebo plesňových buniek v danej vzorke. Metóda, ktorá počíta jednotky tvoriace kolónie, sa označuje ako štandardný počet doštičiek. Životaschopné kolónie, ktoré sa objavia na agarových platniach, sú vyjadrené ako CFU na 1 ml (jednotka tvoriaca kolónie na mililiter) vzorky pre kvapaliny alebo CFU na 1 g (jednotka tvoriaca kolónie na jeden gram) vzorky pre pevné látky.
Na meranie CFU vo vzorke sa používajú dve bežné metódy. Sú metódou roztierania doštičiek a vylievania dosiek. Tieto dve metódy sú podporované technikou nazývanou sériové riedenie. Sériovo zriedené vzorky umožňujú získať spočítateľný počet kolónií na povrchu agaru. Známy objem vzorky je možné rozložiť na povrch agarovej platne alebo zmiešať s agarom a vyliať na misku. Doštička sa potom inkubuje a vzniknuté kolónie sa spočítajú. Počet kolónií súvisí s počtom mikroorganizmov v pôvodnej vzorke. Doštičky, ktoré ukazujú príliš veľa kolónií alebo príliš málo kolónií, sú z počítania vylúčené, pretože výsledky na týchto doštičkách nemusia byť štatisticky presné. Štatisticky je najlepší rozsah 30 - 300 kolónií na agarovej platni. Správne doštičky by preto mali byť vybrané pre presný výpočet. Pre vyššie uvedenú funkciu sa vykonáva sériové riedenie.
Len čo spočítate počet životaschopných kolónií na platniach, je možné vypočítať CFU / ml pomocou nasledujúcej rovnice.
CFU na ml pôvodnej vzorky = počet kolónií na platni X riediaci faktor
Faktor riedenia = (1 / Riedenie doštičky)
Napríklad, ak na doštičke s riedením 10-4 dostanete 149 kolónií, počet baktérií v 1 ml pôvodnej vzorky možno vypočítať takto:
CFU / ml = (149) x (1/10 -4)
= 149 × 10 4 alebo 1490000
= 1. 49 x 10 6
Obrázok 01: Jednotka tvoriaca kolónie
Čo je to MPN?
Najpravdepodobnejším počtom je alternatívne opatrenie k CFU / ml. MPN tiež odhaduje životaschopné bunky vo vzorke kvapaliny. Počíta organizmy rastúce v tekutej kultúre a je to prevažne bakteriologická technika. Táto metóda je obzvlášť užitočná pre vzorky, ktoré obsahujú nízke koncentrácie bakteriálnych buniek; napríklad mlieko, pitná voda atď. Hodnota MPN sa vyjadruje pre 100 ml objemu. MPN sa spolieha na štatistickú metódu založenú na teórii pravdepodobnosti. Existujú štatistické tabuľky určené na nájdenie hodnôt MPN na 100 ml vzorky. V týchto tabuľkách sú uvedené výsledky pri 95% -ných hraniciach spoľahlivosti.
Hodnota MPN sa počíta po vykonaní techniky nazývanej metóda viacnásobnej trubicovej fermentácie. Tri sady skúmaviek obsahujúcich vhodné kultivačné médium sa naočkujú tromi rôznymi objemami vzorky, ako je 10 ml, 1 ml a 0,1 ml, a inkubujú sa kvôli rastu. Po inkubačnej dobe sa skúmavky hodnotia + (pozitívne) alebo - (negatívne) z hľadiska prítomnosti alebo neprítomnosti rastu. Vzor pozitívnych a negatívnych výsledkov sa potom porovnáva s tabuľkou štatistických pravdepodobností MPN na odhad počtu mikroorganizmov. Potom je daná hodnota MPN pre 100 ml vzorky. MPN sa široko používa na detekciu koliformných baktérií prítomných vo vzorkách vody.
Obrázok 02: Tabuľka MPN
Aký je rozdiel medzi CFU a MPN?
Rozdielny článok v strede pred tabuľkou
CFU vs MPN |
|
| CFU je miera používaná na vyjadrenie počtu životaschopných bakteriálnych alebo plesňových kolónií v danej vzorke. | MPN je alternatívnym opatrením k CFU a meria počet životaschopných bakteriálnych buniek v tekutej vzorke. |
| Jednotka | |
| CFU / ml alebo CFU / g | MPN / 100 ml |
| Kalkulácia | |
| CFU sa počíta spočítaním počtu kolónií vypestovaných na agarových platniach. | MPN sa počíta porovnaním pozitívnych a negatívnych obrazcov skúmaviek so štatistickou tabuľkou MPN. |
| Technika sériového riedenia | |
| Pred umiestnením vzoriek na agarové platne sa vykoná sériové zriedenie. | Sériové riedenie sa pri výpočte MPN zvyčajne nevykonáva |
| Metódy | |
| Metóda rozprestretej platne a metóda vyliatej platne sú dva typy metód, ktoré sa používajú na získanie CFU. | Na získanie hodnoty MPN je vykonaná metóda viacnásobnej skúmavky. |
Zhrnutie - CFU vs MPN
Meranie mikrobiálneho rastu je potrebné z mnohých dôvodov. V potravinárskych závodoch je potrebné merať hladinu a typ mikroorganizmov v potravinách. V potravinárskom priemysle a medicíne je potrebné zabezpečiť, aby sa sterilizačné postupy uplatňovali efektívne. V čistiarňach odpadových vôd sa vyžaduje pravidelné počítanie mikróbov. Pri optimalizácii postupu v molekulárnej biológii je potrebné merať počet kolónií na doskách. Preto sú k dispozícii rôzne metódy počítania a merania rastu. CFU a MPN sú dve také metódy, ktoré sa široko používajú v rôznych oblastiach. CFU je mierou počtu životaschopných bakteriálnych a plesňových kolónií prítomných v danej vzorke. Vypočítava sa pomocou štandardnej metódy počítania platní alebo životaschopnej metódy počítania platní. MPN je ďalšie opatrenie, ktoré vyjadruje počet bakteriálnych buniek prítomných v danom objeme kvapalnej vzorky. Vypočíta sa pomocou metódy viacnásobnej trubicovej fermentácie a tabuľky MPN. To je rozdiel medzi CFU a MPN.
Stiahnite si PDF verziu CFU vs MPN
Môžete si stiahnuť verziu tohto článku vo formáte PDF a použiť ho na offline účely podľa citácií. Tu si stiahnite verziu PDF. Rozdiel medzi CFU a MPN.
