Kľúčový rozdiel - HPLC vs HPTLC
Kľúčovým rozdielom medzi HPLC a HPTLC je, že HPLC umožňuje kvantitatívnu separáciu zložiek vo vzorke, zatiaľ čo HPTLC neumožňuje kvantitatívnu separáciu zložiek vo vzorke.
Chromatografia je metóda fyzickej separácie, ktorá sa používa na separáciu a identifikáciu zložiek v zmesi. HPLC aj HPTLC sú chromatografické techniky. HPLC je vysokoúčinná kvapalinová chromatografia. HPTLC je vysokoúčinná chromatografia na tenkej vrstve.
OBSAH
1. Prehľad a kľúčový rozdiel
2. Čo je to HPLC
3. Čo je to HPTLC
4. Porovnanie vedľa seba - HPLC vs. HPTLC v tabuľkovej forme
5. Zhrnutie
Čo je to HPLC?
HPLC je vysokoúčinná kvapalinová chromatografia. Je to analytická technika používaná na separáciu, identifikáciu a kvantifikáciu zložiek v zmesi. Pri tomto postupe sa vzorka rozpustí vo vhodnom rozpúšťadle. Potom prechádza rozpúšťadlo so vzorkou cez čerpadlo s daným tlakom. Čerpadlo je naplnené pevným adsorpčným materiálom. Potom sa niektoré zložky silno viažu na absorpčný materiál, zatiaľ čo iné zložky sa voľne viažu. To spôsobí, že komponenty budú mať rôzne prietoky čerpadlom. Preto je možné komponenty ľahko oddeliť.
Obrázok 01: Systém HPLC
Adsorpčný materiál, ktorý plní čerpadlo, je známy ako stacionárna fáza. Rozpúšťadlo s rozpustenou vzorkou je známe ako mobilná fáza. Čerpadlo použité v tejto technike sa nazýva stĺpec. Kolóna je naplnená adsorpčným materiálom, najčastejšie časticami oxidu kremičitého. Veľkosť týchto častíc sa môže pohybovať od 2 do 50 μm. Proces separácie je ovplyvnený zložením mobilnej fázy a teplotou systému. Interakcie medzi stacionárnou fázou a zložkou vo vzorke môžu byť hydrofóbne interakcie, interakcie dipól-dipól, iónová väzba atď.
Prevádzkový tlak pri HPLC je podstatne vyšší ako pri tradičnej kvapalinovej chromatografii. Leží okolo 50 - 350 barov. Rozdiel medzi kvapalinovou chromatografiou a HPLC spočíva v tom, že pri kvapalinovej chromatografii vzorka prepadne kolónou gravitačne, zatiaľ čo pri HPLC sa vzorka pretlačí cez kolónu. Veľkosť kolóny a absorpčných častíc sú tiež veľmi malé v porovnaní s tradičnou kvapalinovou chromatografiou. Rozlíšenie dané technikou HPLC je však lepšie.
Čo je to HPTLC?
HPTLC je vysokoúčinná chromatografia na tenkej vrstve. Je to pokročilá a automatizovaná forma tradičnej TLC. Táto technika poskytuje efektívne rozlíšenie v krátkom časovom období. Pri tejto analytickej metóde možno vzorku a referenciu analyzovať súčasne, čo umožňuje porovnanie vzorky s referenciou. Poskytuje vylepšenú analytickú presnosť ako iné chromatografické techniky. Čas potrebný na analýzu je kratší. Táto technika je nízkonákladovou technikou.
Obrázok 02: Analýza potravinárskych farbív pomocou HPTLC
Metóda HPTLC je jednoduchý proces a odpadá tiež krok prípravy vzorky (v tradičnej TLC je krok prípravy vzorky zahrnutý pred separáciou. Tento krok zahŕňa čistenie a obohatenie). Rozpúšťadlo sa môže použiť priamo bez akejkoľvek predbežnej úpravy, aj keď iné chromatografické techniky vyžadujú predbežnú úpravu, ako je odplynenie, filtrácia atď.
Adsorpčným materiálom použitým v HPTLC je oxid kremičitý s veľmi malými veľkosťami častíc. V tradičnej TLC je veľkosť častíc oxidu kremičitého 5-20 μm, zatiaľ čo v HPTLC je to 4-8 μm. Vzorka sa pomocou aplikátora nanesie na dosku HPTLC. Poskytuje jednotné a bezpečné použitie. Potom sa platne umiestnia do komory s mobilnou fázou. Komora by mala byť nasýtená parami mobilnej fázy. Po procese HPTLC možno zistiť škvrny, ktoré sa presunuli. Pri detekcii škvŕn na platni používa technika HPTLC vhodnú UV oblasť alebo jódovú komoru.
Aký je rozdiel medzi HPLC a HPTLC?
Rozdielny článok v strede pred tabuľkou
HPLC vs HPTLC |
|
| HPLC je vysokoúčinná kvapalinová chromatografia. | HPTLC je vysokoúčinná chromatografia na tenkej vrstve. |
| Technika | |
| Pri HPLC sa mobilná fáza s rozpúšťadlom nechá prejsť kolónou naplnenou stacionárnou fázou. | V HPTLC sa vzorka nanesie na TLC platňu a umiestni sa do komory obsahujúcej mobilnú fázu; potom sa nechá vzorka migrovať smerom hore doskou spolu s mobilnou fázou. |
| Meranie | |
| Pri HPLC sa na oddelenie zložiek vo vzorke používajú rozdiely medzi rýchlosťami prietoku zložiek kolónou. | V HPTLC sa rozdiely medzi vzdialenosťami prejdenými každou zložkou vo vzorke používajú na oddelenie zložiek vo vzorke. |
| Kvantitatívna separácia | |
| HPLC umožňuje kvantitatívnu separáciu zložiek vo vzorke. | HPTLC neumožňuje kvantitatívne oddelenie zložiek vo vzorke. |
Zhrnutie - HPLC vs HPTLC
HPLC a HPTLC sú dve chromatografické techniky. Kľúčovým rozdielom medzi HPLC a HPTLC je, že HPLC umožňuje kvantitatívnu separáciu zložiek vo vzorke, zatiaľ čo HPTLC neumožňuje kvantitatívnu separáciu zložiek vo vzorke.
