Kľúčový rozdiel - HPLC vs LCMS
Pred analýzou rozdielu medzi HPLC a LCMS sa najskôr pozrime na význam HPLC a LCMS. Chromatografia je separačná technika v chemickej analýze, pri ktorej sa zložky vzorky separujú počas prechodu cez chromatografické médium. Zahŕňa tiež interakciu so vzorkou, stacionárnou fázou a mobilnou fázou. Skratka HPLC znamená vysokoúčinnú kvapalinovú chromatografiu a v analytickej chémii sa používa ako metóda kvapalinovej chromatografie. Kombinácia kvapalinovej chromatografie a hmotnostnej spektroskopie (LCMS) bola vyvinutá pre kvantitatívnu analýzu vybraných biomolekúl a ide o vysoko citlivý, presný a špecifický postup v porovnaní s HPLC. Toto je kľúčový rozdiel medzi HPLC a LCMC. Tento článok vás zoznámi s HPLC a LCMC, ktoré sa zaoberajú chemickou analýzou a diskutujú o rozdieloch medzi HPLC a LCMS.
Čo je to HPLC?
Vysokoúčinná kvapalinová chromatografia (HPLC) je populárna separačná technika v analytickej chémii. Používa sa hlavne na oddelenie zložiek, na identifikáciu a kvantifikáciu každej zložky v zmesi. Táto metóda bola predtým známa ako vysokotlaková kvapalinová chromatografia, pretože závisela od čerpadiel, aby prúdili stlačené kvapalné rozpúšťadlo obsahujúce zmes vzoriek cez kolónu naplnenú pevným adsorpčným materiálom. Každá zložka vo zmesi vzorky interaguje odlišne s tuhým adsorpčným materiálom, čo vedie k rozdielnym prietokom pre rôzne zložky. To môže viesť k separácii zložiek, ktoré vytekajú z HPLC kolóny.
HPLC sa používa na rôzne aplikácie, ako je analýza hladín vitamínu D v krvi, nelegálne užívanie drog športovcami zisťovaním zvyškov liečiva v moči, triedenie zložiek komplexnej biologickej vzorky na výskumné účely a analýza a výroba farmaceutických výrobkov.
Čo je to LCMS?
Kvapalinová chromatografia - hmotnostná spektrometria (LCMS) je analytická technika, ktorá kombinuje schopnosti fyzickej separácie kvapalinovej chromatografie s schopnosťami hmotnostnej analýzy hmotnostnej spektrometrie (MS). Kvapalinová chromatografia je separačná technika a na analýzu pomeru hmotnosti k náboju nabitých častíc sa používa hmotnostná spektrometria. Fyzikálna separácia sa zvyčajne dosahuje pomocou HPLC a alternatívne LCMS tiež známej ako HPLC-MS. LCMS je dominantná analytická technika, ktorá má v porovnaní s HPLC veľmi vysokú presnosť, citlivosť a špecificitu. Je teda užitočný v mnohých aplikáciách, ako sú výskumné účely, analýza liekov, analýza potravín atď. LCMS sa používa hlavne na separáciu, detekciu, identifikáciu a kvantifikáciu biochemických vlastností konkrétnej vzorky v prítomnosti komplexných chemických zmesí.
Aký je rozdiel medzi HPLC a LCMC?
Skratka a definícia HPLC a LCMC
HPLC: HPLC znamená vysokoúčinná kvapalinová chromatografia. Jedná sa o separačnú techniku, ktorá sa používa hlavne na oddelenie zložiek, na identifikáciu a kvantifikáciu každej zložky v zmesi.
LCMS: LCMS znamená kvapalinová chromatografia a hmotnostná spektrometria. Jedná sa o analytickú techniku, ktorá kombinuje fyzikálne separačné schopnosti kvapalinovej chromatografie so schopnosťami hmotnostnej analýzy hmotnostnej spektrometrie (MS).
Charakteristiky HPLC a LCMC
Klasifikácia
HPLC: Toto je iba metóda kvapalinovej chromatografie.
LCMS: Toto je kombinácia metódy kvapalinovej chromatografie a metódy hmotnostnej spektrometrie.
Účinnosť
HPLC: V porovnaní s LCMS je HPLC analýza menej efektívna a pomalšia.
LCMS: V porovnaní s HPLC je LCMS analýza efektívna a rýchlejšia.
Citlivosť
HPLC: V porovnaní s LCMS je HPLC analýza menej citlivá.
LCMS: V porovnaní s HPLC je LCMS analýza citlivejšia.
Špecifickosť
HPLC: V porovnaní s LCMS je HPLC analýza menej špecifická.
LCMS: V porovnaní s HPLC je LCMS analýza konkrétnejšia.
Presnosť
HPLC: HPLC poskytuje menej presné výsledky ako LCMS pre stanovenie niektorých chemikálií.
LCMS: LCMS poskytuje presnejšie výsledky ako HPLC pri stanovení niektorých chemikálií.
Komponent
HPLC: HPLC možno považovať za zložku LCMS.
LCMS: LCMS nemožno považovať za zložku HPLC.
Iónový zdroj
HPLC: Zdroj iónov v prístroji HPLC neexistuje.
LCMS: Zdroj iónov je prítomný v prístroji LCMS.
Aplikácie
HPLC: Ióny, polyméry, organické molekuly a biomolekuly je možné analyzovať pomocou HPLC.
LCMS: Môžu sa analyzovať organické molekuly a biomolekuly. Na rozdiel od HPLC sa môže LCMS použiť na vyšetrenie neúplne rozdelených zmesí.
Prevádzka
HPLC: Schéma prístroja HPLC je uvedená na obrázku 1 a zvyčajne obsahuje autosampler, pumpy a detektor. Vzorkovač zavedie zmes vzorky do mobilnej fázy (tlaková zmes rozpúšťadiel, ako je voda, acetonitril a / alebo metanol), ktorá ju prenesie do kolóny. Čerpadlá dodávajú požadovaný prietok a zloženie mobilnej fázy cez kolónu. Kolóna je naplnená adsorbentom, ktorým sú zrnité pevné častice, ako je oxid kremičitý alebo polyméry. Detektor produkuje signál úmerný množstvu prítomných zložiek vzorky v kolóne, čo umožňuje kvantifikovateľnú analýzu vybraných zložiek vzorky. Prístroj HPLC je kontrolovaný a analýza dát je zabezpečená digitálnym mikroprocesorom a užívateľským softvérom.
Obrázok 1: Schéma prístroja HPLC
LCMS: Schéma LCMS prístroja je uvedené na obrázku 2. Extrakt vzorky sa vloží do kolóny pozostávajúcej z HPLC. Tento stĺpec obsahuje vzorky metabolitov na základe fyzikálnych znakov a rôzne metabolity prúdia do hmotnostného spektrometra v rôznych časových intervaloch. Hmotnostná spektroskopia sa používa na hodnotenie hmotností častíc, na určenie elementárneho usporiadania molekuly a na objasnenie štruktúr molekúl. Vzorka by však mala byť ionizovaná, aby sa vytvorili nabité molekuly, aby sa určil ich pomer hmotnosti k náboju. Preto namiesto prístrojov HPLC pozostáva LCMS z ďalších troch modulov, ako je zdroj železa, hmotnostný analyzátor a detektor. Zdroj iónov môže transformovať vzorku plynnej fázy na ióny a hmotnostný analyzátor zoskupiť ióny podľa ich hmotností pomocou elektromagnetických polí. Nakoniecdetektor kvantifikuje hodnoty a dodáva údaje o každom ióne prítomnom vo vzorke. Techniku LCMS je možné použiť pre kvalitatívne aj kvantitatívne aplikácie.
Obrázok 2: Schéma LCMS prístroja
Záverom možno povedať, že HPLC je metóda kvapalinovej chromatografie, zatiaľ čo LCMS je kombináciou kvapalinovej chromatografie a hmotnostnej spektrometrie. Obe tieto analytické techniky majú odlišné vlastnosti, ale je možné ich použiť na identifikáciu a kvantifikáciu zloženia potravín, liečiv a iných bioaktívnych molekúl.
