Kľúčový rozdiel - imunocytochémia vs. imunohistochémia
Imunocytochémia (ICC) a imunohistochémia (IHC) sú dve široko používané techniky v molekulárnej diagnostike, ktoré identifikujú a potvrdzujú výskyt neprenosných chorôb aj prenosných chorôb na základe molekulárnych markerov prítomných v bunkách. Kľúčovým rozdielom imunocytochémie a imunohistochémie je molekula, ktorá sa používa ako postup analýzy v týchto technikách. Na ICC sa používajú primárne a sekundárne protilátky konjugované so značkami, ako je fluorescencia, zatiaľ čo na diagnostické stanovenie sa používajú IHC, monoklonálne a polyklonálne protilátky.
OBSAH
1. Prehľad a kľúčový rozdiel
2. Čo je to imunocytochémia
3. Čo je to imunohistochémia
4. Podobnosti medzi imunocytochémiou a imunohistochémiou
5. Porovnanie vedľa seba - imunocytochémia oproti imunohistochémii v tabuľkovej forme
6. Zhrnutie
Čo je to imunocytochémia (ICC)?
ICC používa primárne a sekundárne protilátky viazané na markery, ako sú fluorescenčné markery alebo enzýmy, a je účinnou detekčnou metódou na detekciu antigénov prítomných v cieľových bunkách, ktorými môžu byť buď infekčné bunkové častice, alebo rakovinové nádorové bunky. Pre imunocytochémiu sú potrebné tri typy kontrol.
- Primárna protilátka - kontrola, ktorá ukazuje špecifickosť väzby primárnej protilátky na antigén
- Sekundárna protilátka - kontrola, ktorá ukazuje, že značka je špecifická pre primárnu protilátku
- Ovládacie prvky štítkov - ukazujú, že štítok je výsledkom pridaného štítku a nie výsledkom endogénneho označenia.
Obrázok 01: Imunocytochémia označuje jednotlivé proteíny v bunkách (tu je tyrozínhydroxyláza v axónoch sympatických autonómnych neurónov zobrazená zelenou farbou).
Kontrola primárnej protilátky je špecifická pre každú novú protilátku a nemožno ju opakovať pre každý experiment. Kontrola sekundárnych protilátok je navrhnutá na základe primárnej protilátky použitej v experimente a je súčasťou každého experimentu. Kontrola označovania je zahrnutá, ak sa zmení stav postupu, zmení sa vzorka alebo sa zistí neočakávané označenie.
Dve hlavné aplikácie ICC sú Radio Immuno - Assay (RIA) a Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Najbežnejšou použitou protilátkou je imunoglobulín G.
Čo je to imunohistochémia (IHC)?
V imunohistochémii obsahuje zdrojová vzorka monoklonálne a polyklonálne protilátky na stanovenie prítomnosti antigénov v cudzích bunkách. Táto technika je založená na špecifickej reakcii väzby antigén-protilátka. Protilátky použité pri detekcii môžu byť označené rôznymi markermi; môžu to byť fluorescenčné markery, rádioaktívne značené markery alebo chemické markery. Uľahčením in vitro väzby medzi antigénom a cieľovou protilátkou možno určiť prítomnosť alebo neprítomnosť konkrétneho proteínu bunky.
Obrázok 02: Imunohistochemické farbenie normálnych obličiek obličkami pomocou CD10
V súčasnosti sa vedci podieľajú na vývoji cieľových protilátok pre špecifické antigény prítomné v bunkách, ktoré sa môžu vyvinúť ako zhubné nádorové bunky alebo antigény prítomné v infekčných agensoch, ako je HIV.
Aké sú podobnosti medzi imunocytochémiou a imunohistochémiou?
- Reakcie sú veľmi špecifické a presné v ICC a IHC.
- Aplikácie ICC a IHC zahŕňajú diagnostiku rakoviny a infekčných chorôb.
- Sterilné podmienky by sa mali udržiavať za obidvoch podmienok a mali by sa vykonávať in vitro
- Obidve techniky poskytujú reprodukovateľné výsledky.
- Oba sú rýchle.
- Rádiové značenie, fluorescenčné techniky sa používajú ako detekčné metódy v ICC aj IHC.
- Oba sú založené na párovaní antigén-protilátka.
Aký je rozdiel medzi imunocytochémiou a imunohistochémiou?
Rozdielny článok v strede pred tabuľkou
Imunocytochémia (ICC) vs Imunohistochemistry (IHC) |
|
| ICC používa markery viazané na primárne a sekundárne protilátky, ako sú fluorescenčné markery alebo enzýmy, a je účinnou detekčnou metódou na detekciu antigénov prítomných v cieľových bunkách. | IHC je metóda, ktorá využíva monoklonálne a polyklonálne protilátky na stanovenie prítomnosti antigénov, ktoré sú špeciálnymi proteínovými markermi umiestnenými na bunkových povrchoch. |
| Vzorový zdroj | |
| V ICC sa používajú vzorky pochádzajúce z tkanív, ktoré boli histologicky spracované na tenké rezy. | IHC používa vzorky pozostávajúce z buniek pestovaných v monovrstve alebo buniek v suspenzii, ktoré sa ukladajú na podložné sklíčko. |
| Spracovanie vzorky | |
| V ICC by bunky mali byť priepustné, aby sa uľahčil prienik protilátok k intracelulárnym cieľom. | V IHC sú bunky pred farbením fixované formalínom, zaliate parafínom. |
Zhrnutie - Imunocytochémia vs. Imunohistochémia
Molekulárna diagnostika sa používa na identifikáciu a potvrdenie výskytu neprenosných chorôb aj prenosných chorôb na základe molekulárnych markerov prítomných v bunkách. Molekulárnymi markermi môžu byť proteíny alebo sekvencie DNA alebo RNA; vývoj technológií ako ICC a IHC pripravil vedcom cestu k identifikácii choroby a jej príčiny v ranom štádiu. ICC aj IHC závisia od špecifických reakcií medzi protilátkou a antigénom, hoci ide o zdroj vzorky. Hlavným rozdielom medzi imunocytochémiou a imunohistochémiou je spracovanie vzoriek týchto dvoch postupov.
Stiahnite si PDF verziu imunocytochémie a imunohistochémie
Môžete si stiahnuť verziu tohto článku vo formáte PDF a použiť ho na offline účely podľa citačnej poznámky. Stiahnite si tu PDF verziu. Rozdiel medzi imunocytochémiou a imunohistochémiou.
